探寻试管婴儿操作基本步骤

试管婴儿的步骤因患者的具体情况而有一些差异。它可以是简单的试管婴儿和胚胎移植，也可能是试管婴儿加上其他的辅助生殖技术，如显微授精、辅助生殖、外科方法取精、卵子的体外成熟、卵子／精子／胚胎冷冻、胚胎着床前诊断等。先介绍简单的试管婴儿和胚胎移植技术，它是试管婴儿技术的基础。

试管婴儿的基本步骤是：让女性产生数个卵子，将卵子从卵巢内取出，精子从男性取出，在试管婴儿实验室里使精子和卵子受精，受精后的卵子体外培养以便选择好的胚胎用来移植，将胚胎移植到患者的子宫，胚胎移植后的妊娠支持，胚胎移植后的妊娠检查，妊娠后的胎儿数日检查及胚胎着床部位的确定等。

１．女性患者的卵子产生

女性患者的卵子产生在临床上叫做控制性超排卵处理，需要１０～１５天的时间。

什么是超排卵处理？为何要进行超排卵处理呢？

下文从自然排卵谈起。妇女的自然排卵周期中一般只有１个（有时也有１个以上）的优势卵泡发育，这个优势卵泡内的卵子成熟、排卵，受精后只能形成１个胚胎（单胎）。如果有两个卵成熟、排卵，受精后就会形成两个胚胎（异卵双胞胎）。如果有１个卵成熟、排卵，受精后形成１个胚胎，但这个胚胎在着床前分裂成两部分，也会形成两个胚胎（同卵双胞胎）。

由此可见，一般自然排卵也就是１个。而用这１个卵来进行试管婴儿的话，最多只能生产１个胚胎。在胚胎移植时就没有选择的余地。移植１个胚胎的妊娠率是很低的。有时，这个卵可能不被受精或不发育，就没有机会怀孕。所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能，以达到不受自然周期的限制，获得多个健康卵子的目的，这样在实验室里可以培养出更多的胚胎，从中选择高质量的胚胎移植，就能增加怀孕的机会。

控制性超排卵一般是先用一种叫ＧｎＲＨＡ（促性腺激素释放激素激动剂，具体是达菲林和达必佳）的激素药物，它能阻止体内促卵泡激素和促黄体激素的分泌，这样外源性的激素就更能发挥作用。再用卵泡生长的激素刺激卵巢中的卵泡成长。为了使卵巢内的多个卵泡同时发育，一般患者是在月经期的第２－３天开始用促卵泡激素，这时的卵巢内一般没有大的卵泡。

依据患者对药物的反应调整药物使用剂量和使用时间，患者的年龄和对药物的反应不同，用药的剂量和用药时间也不同。待卵泡长到一定程度，卵泡内的卵子长到能够成熟的大小，再给予促卵子成熟的激素。等卵子基木成熟，但还没有排卵之前，通过手术方法把它们取出来。

对于大多数患者，需持续用药１０天左右，有些可能短到８天，而长者可达１５～１６天。药物的种类和剂量取决于病人的具体情况（细节请读排卵药物和排卵处理章节）。

在一些治疗周期中，应用药物后排卵可能会自动发生。当自动排卵发生时，卵子可能在盆腔中丢失，这个周期为此必须取消。有些患者可能在用药几天后，卵巢仍然没有反应，即无任何卵泡生长．对于这种情况，医生也会取消这一治疗周期。

２．卵子诱导成熟（取卵前３５～３６小时）

上述用药大多数情况下只能使卵子长大，但是还不能获得成熟卵。为了评价卵泡内的卵子是否具有成熟能力，医生必须用超声仪来监测卵泡的大小，并配合检查血液的雌激素水平。当２或３个以上的卵泡直径大于１。８～２厘米，雌激素水平与卵泡数量相符时，这时的卵子就具有成熟的能力了。医生便可注射人绒毛促性腺激素促使卵泡内卵子成熟。人卵子的成熟时间大约是３６－４０小时，注射人绒毛促性腺激素后必须在３５～３６小时内取出。因此，医生会安排患者的取卵时间。由于取卵手术一般是在上午进行，所以注射人绒毛促性腺激素的时间一般在前两天的下午到晚上进行。

３．取卵（胚胎的第０天）

取卵是在注射了人绒毛促性腺激素的３５～３６小时内进行。过早或过迟取卵都会影响卵的取出率和取出卵的质量。过早可能会使卵子未能完全成熟，有较多的未成熟卵，而过迟有可能使一些大卵泡排卵，因而取不到卵。

取卵是一个小手术，可以是在全身麻醉下或是在局部麻巢下进行。经阴道超声仪引导，将取卵针穿过阴道，直达卵巢吸取卵子后，实验室人员立即在显微镜下将吸到的卵子移到含有胚胎培养液的培养皿中，置于３７℃的培养箱中培养。由于阴道内超声波吸入术是一种小手术，有些医生为了让患者节约费用只使用止痛药而不使用全身麻醉。

一般取卵时间在３０分钟之内。患者取卵后只有轻微的疼痛和极少量的出血，休息１～２个小时就可以回家，不会影响日常工作和生活。由于卵泡大小不一，因此取出的卵子的成熟阶段并不完全一致。有的可能是未成熟的，而有的可能是过成熟的。刚取出的卵周围被卵丘细胞所包围，一般可以通过这些细胞的扩张程度判断出卵子的成熟情况。但是，要知道它们的准确成熟阶段，必须将这些细胞与卵子分开。一般说来，可发现有以下几种卵子：

１）成熟卵透明带下的卵周隙内有一个小的细胞，叫做第一极体，它是由卵子释放的。第一极体的释放是卵子成熟的指标。

２）未成熟卵有两种不同时期的未成熟卵。一种是在透明带下的卵周隙内没有第一极体，但卵子内有一个明显的核，叫做生发泡，这种卵叫做生发泡期卵，这是最早期的未成熟卵。另一种是卵子的卵周隙内没有第一极体，卵子内也没有一个明显的核，这是处于生发泡期卵和成熟卵之间的未成熟卵。未成熟卵是不能用于受精的，必须等到它们完全成熟后才能用来受精。

３）过成熟卵卵子成熟后必须受精。从卵子成熟到受精之间的时间一般是５～６个小时。如果在这个时间段内未能受精，卵子将会开始老化，最后死亡。由于卵子取出的时候卵泡大小不一，卵子的成熟阶段也就不可能在同一个时期。如果用时间过长，或卵子在受精前的体外时间过长都会使卵子过成熟。虽然过成熟卵能够被受精，但是由它产生的胚胎质量将会很差，胚胎移植后很难怀孕。

４）异常卵有些卵从体积上看要比正常卵大许多，卵周隙内有两个第一极体，这样的卵的染色体是异常的，通常有两套染色体，因此是不能用来受精的。有的卵可能在成熟的某一阶段细胞内有异常的形态，如空泡、质地变黑等，这些都是卵子质量不好的标志。

４．取精（胚胎的第０天）

用于试管婴儿的精子可以是新鲜采集的精液，也可以是冷冻保存的精液或者是从睾丸、附睾内抽取的精子。

如果是新鲜精液，采集应与取卵同时进行。实验室工作人员或护士会告诉病人注意事项和采集方法，并提供无菌的精液采集小杯。精液采集后，需马上送到实验室，实验室工作人员接照实验室方法处理精液，包括将液化的精液在加入洗涤液后离心，将精浆除去，再用上游法或密度梯度离心法将活动的精子分离出来。

如果是睾丸或附睾内抽取精子，丈夫需要做一个小手术来取得精子。如果是冷冻精子或供精（大多数是冷冻精子），精子应该在取卵前储藏在实验室，不需男性患者当天去门诊。