试管冷冻胚胎其实没有要求细胞数量,只是一般情况下胚胎需要达到6-10细胞才可以冻起来。当然,能否进行冷冻还要结合胚胎形态学进行评估,对于细胞的均一程度、细胞的形态、碎片情况都有要求。另外,胚胎冷冻后质量变化的可能性小,但是并不代表没有。
卵裂期胚胎和囊胚均可冷冻,细胞数量不是能否冷冻保存的唯一标准。对于卵裂期胚胎来说,多是受精卵培养第3天形成的胚胎,按正常的卵裂规律胚胎第3天可发育为8细胞,但实际的胚胎发育快慢不一,一般认为7-9细胞都属于较好的个数。
但能否进行冷冻还要结合胚胎形态学进行评估,对于细胞的均一程度、细胞的形态、碎片情况都有要求,Ⅰ级标准细胞大小均一、形态规则、碎片率<5%,Ⅱ级标准细胞大小稍不一、形态稍不规则、5%<碎片率<20%。多认为第三天胚胎7-9细胞且形态学处于Ⅰ、Ⅱ级胚胎质量较好,适合冷冻。
对于囊胚来说,多是受精卵培养第5天形成的胚胎,由于有囊内细胞团和滋养层细胞,细胞数量较多,故多不以细胞数为依据评定是否冷冻,不过多认为第5天囊胚细胞总数量在150-250时,发育潜能更高,更适合冷冻。
1、卵裂球数目和大小
一般质量比较好的胚胎,发育在第三天的时候会分裂6-10个细胞,并且细胞大小均匀,外观整齐,此时可以将胚胎冻起来,这是冷冻胚胎最基本的标准之一。
2、颗粒物
胚胎质量的好坏还取决于胞质当中的颗粒物,比如胚胎是否有小空泡、多核等,三级胚胎的要求是胞质有明显颗粒,但没有严重的颗粒现象,此时才能将胚胎进行冷冻。
3、胚胎碎片率
一般情况下,胚胎碎片率低于5%的时候,证明胚胎凋亡或者已受损的细胞数量比较少,染色体异常率和基因遗传缺陷率低,在一定程度上可以反应胚胎的质量比较好,而冷冻胚胎则需要满足碎片率低于20%的要求。
1、升级:冷冻胚胎解冻后升级为一体化胚胎可以表明其质量本身更好,升级后的质量比解冻前更好。冷冻胚胎解冻后内部细胞在恢复过程中的持续发育可能升级为一体化胚胎,这是囊胚的早期形式。
2、降级:试管中,冷冻胚胎是不会使胚胎的质量发生变化的,因为储存时比较稳定,又比较安全,但是解冻的时候,可能会因为实验室的环境或者是医生的操作,导致胚胎降级。
总之,试管胚胎冷冻不要求细胞数。