胚胎体外培养
首先,我们都知道俄罗斯试管婴儿促排后等卵泡大小合适时就会开始打HCG,,然后在34—36小时后取卵,过几个小时后通过与精子受精(如果不是第三代技术那就需要做卵胞浆内单精子注射)。一般把这一天定为胚胎的第0天。
第1天:过夜后上午观察卵子是否受精(是否有两个原核);
第2天:观察受精卵是否分裂,是几细胞(4细胞最好),是否有碎片(没有碎片好),是否对称(对称的好);
第3天:同第2天,看是几细胞(8—10细胞最好),看是否有碎片和是否对称。
第4天:胚胎发育到桑椹胚阶段。
第5天:胚胎发育到囊胚阶段。
胚胎等级划分
目前全世界的试管婴儿医院胚胎等级划分标准并不统一,比如AA级囊胚评级非常稀有,AB级的囊胚似乎就比较常见。还有的可能用“811”这样的评级法来评定第三天的胚胎,而其他的可能用8A来表示(也就是说811=8A,只不过表达方式不同)。
俄罗斯试管婴儿的胚胎移植或胚胎冷冻一般在胚胎的第三天,或者是第五天。这是因为卵子刚取出来时只是单细胞,完成受精后的12—24小时,会在培养液里发育并分裂,到第三天一般是4-8细胞的胚胎;而到第五天,大约发展成上百个细胞,此时胚胎就是我们常提起的囊胚;界于两者之间(一般是第四天),还有一个阶段叫桑葚胚(因桑葚胚比较难评级,一般不做评级)。
第三天(D3)胚胎的评级
I级: 胚胎发育速度正常,卵裂球均匀、数目均等,细胞质均一、无空泡,碎片不超过5%;
II级:胚胎发育速度正常,卵裂球均匀或大致均匀,数目均等或大致均等,细胞质均一、无空泡,碎片占5%-10%;(此处还有个说法是2.5级:大致均匀,有些碎片)
III级:胚胎发育速度大致正常,卵裂球不均匀/均匀,数目不均等/均等,细胞质中有少量空泡,碎片少于15%。
IV级:胚胎发育速度异常,卵裂球不均匀、数目不均等,细胞质不均一、有大量空泡,碎片大于15%。
级别的好坏,依次是Ⅰ级>Ⅱ级>Ⅲ级>Ⅳ级。Ⅰ级和Ⅱ级统称为优质胚胎,Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级又统称为可移植/可冷冻胚胎。
第五天(D5)囊胚的评级
第五天的胚胎就是囊胚期,这时候是根据囊胚腔的大小和是否孵化来将囊胚的发育分为六个时期:
1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2;
2期:囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2;
3期:完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积;
4期:扩张囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄;
5期:正在孵出的囊胚,囊胚的一部分从透明带中逸出;
6期:孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出。
处于3至6期的囊胚,还需对其内细胞团和滋养层细胞进行质量分级。
内细胞团分级:(内层细胞,将会继续发育成“胎儿”)
A级:细胞数目多,排列紧密;
B级:细胞数目少,排列松散;
C级:细胞数目很少。
滋养层细胞分级:(外层细胞,将继续发育成“胎盘”)
A级:上皮细胞层由较多的细胞组成,结构致密;
B级:上皮细胞层由不多的细胞组成,结构松散;
C级:上皮细胞层由稀疏的细胞组成。
所以根据评级,4AA囊胚它就是一个细胞排列紧密、几乎没有碎片、还没有孵出的囊胚,通常被认为最适合移植的囊胚。
5AA或6AA,虽然看起来比4AA的更有发育潜能,但是也有一些观念认为:因为部分细胞已从透明带逸出,在实质移植操作中反而不如4AA的囊胚更好。
因为每个最低级别不太一样,比如有的接纳的最低级别囊胚是3CC,低于此级别的,则没有移植或冻起来的意义了。但是患者的卵多卵少,也会影响试管婴儿医院对囊胚的取舍,患者胚胎多的,3BC这样的级别可能就舍掉不用了,而对卵少的患者来说,一个3BC也许就能成功孕育一个宝宝。
当然也会有胚胎发育慢,到第六天(D6)甚至第七天(D7)才发育成囊胚。因此,除了三个数字以外,囊胚的天数还是判断其发育潜能的重要指标。通常来说,D5的最好,D6的次之,D7的再次之。
再晚一点发育的,基本上被认为没有什么发育潜能,D7形成的囊胚虽然慢了点,移植成功率也低一些,但是能挺到这个时候还没有牺牲,也是有着十分强大的求生意识。
俄罗斯ГЕНЕЗИС医院顶尖水平的胚胎实验室,在辅助生殖医疗领域,冷冻卵子、精子、胚胎等辅助生殖技术是一项很好的保存生育力的方式。
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